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IP裂解液

貨號:G2038-100ML

品牌:Servicebio

價格:¥100

規格: 100ml

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  產品簡介:

  IP裂解液是一種在非變性條件下裂解細胞或組織的裂解液,可保留細胞內的蛋白與蛋白或蛋白與核酸之間相互作用。本裂解液裂解的樣本,主要應用于免疫沉淀IP(ImmunolPrecipitation)、免疫共沉淀(co-IP)、ChIP(ChromatinImmunopre-cipitation)等特殊實驗。其主要成分為Tris-Hcl,NaCl, EDTA-Na2, NP-40, Sodium deoxycholate。

  包裝內容:

產品貨號 產品名稱 規格
G2038 IP裂解液 100 mL

  保存條件: 4℃保存,有效期12個月。

  操作說明:

  對于組織樣品:

  1.組織塊用冷PBS洗滌,去除血污。剪成小塊置于勻漿器中。

  2.加入10倍組織體積本試劑(使用前數分鐘內加入蛋白酶抑制劑)冰上徹底勻漿。

  3.將勻漿液轉移至1.5 mL離心管中,振蕩。冰浴30 min,期間用移液器反復吹打,確保細胞完全裂解。

  4.12000g離心5 min,收集上清,即為總蛋白溶液。

  對于培養細胞樣品:

  1.對于貼壁細胞:

  a.用PBS沖洗細胞2-3次。最后一次徹底吸干殘留液。

  b.加入適當體積本試劑(使用前數分內加入蛋白酶抑制劑)于培養板、瓶內3-5 min。期間反復晃動培養板、瓶,使試劑與細胞充分接觸。

  c.用細胞刮刀將細胞及試劑刮下,收集到1.5mL離心管中。

  2.對于懸浮細胞:

  離心收集細胞,每6孔板細胞加約250 uL本試劑(在使用前數分鐘內加入蛋白酶抑制劑),振蕩。

  冰浴30 min,期間每10 min用200uL移液器反復吹打數次,確保細胞完全裂解。

  3.12000g離心5min,收集上清,即為總蛋白。

  注意事項:

  對于組織樣品:

  每50mg組織約加入1mL的本試劑裂解。對于軟骨、皮膚等組織,可適當減少試劑用量,以提高蛋白濃度。

  對于培養細胞樣品:

  1.正常細胞密度下,每個6孔板細胞加入250uL左右裂解液。其它類推。

  2.裂解時可能會出現較粘稠狀??捎靡埔浩鞣磸痛荡?,直至呈液狀為止。如果一直較稠,可用渦旋儀振蕩或再加入適量裂解液。

  3.此試劑對人體有害,請適當防護。

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